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為了建立基于QPCR的快速方法檢測米飯中產(chǎn)嘔吐毒素蠟樣芽孢桿菌,首先采用煮沸法提取蠟樣芽孢桿菌基因組DNA,并利用普通PCR方法驗證引物特異性,然后通過在米飯樣品中添加目標(biāo)菌,模擬受污染的實(shí)際樣本,用QPCR技術(shù)定量檢測米飯中產(chǎn)嘔吐毒素蠟樣芽孢桿菌。結(jié)果表明該方法具有快速、特異性強(qiáng)、靈敏度高和穩(wěn)定性好的優(yōu)點(diǎn),能對產(chǎn)嘔吐毒素蠟樣芽孢桿菌定量。不經(jīng)過增菌培養(yǎng),實(shí)際樣品的檢測限為9.8×101CFU/g;經(jīng)過2 h的增菌培養(yǎng),檢測限能達(dá)到100CFU/g;并且米飯中添加其他雜菌后,不影響對蠟樣芽孢桿菌的檢測。建立的QPCR方法適用于米飯等相關(guān)淀粉類食品中產(chǎn)嘔吐毒素蠟樣芽孢桿菌的檢測,從而為監(jiān)測該菌所致食品污染以及早期相關(guān)食物中毒提供快速定量檢測方法。
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